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豬肉中 19 種獸藥多殘留的分析磷脂去除專用柱

更新時(shí)間：2021-09-01 點(diǎn)擊次數(shù)：1902

豬肉中 19 種獸藥多殘留的 UPLC/MS/MS 分析

（磷脂去除專用柱）

（本方法適用于肉制品中多種獸藥殘留的測(cè)定）

一、樣品提取

1）稱取豬肉 2.0g 于 50mL 離心管中，加入濃度為 100ppm 氟尼辛 -D3 內(nèi)標(biāo)物 40μL，再加 2.0mL 0.1M Na2EDTA 溶液，渦旋混勻 1min，冰浴超聲提取 10min，于 4℃ 9000r/min 下離心 5min，移上清液于另一 15mL 離心管中；

2）再加入 7.0mL 2% 甲酸乙腈于 50mL 離心管中，渦旋5min，于 4℃ 9000r/min 下離心 5min，合并兩次上清液，用 2%甲酸乙腈定容至 10mL；

3）將合并定容后的上清液，于 4 ℃ 9000r/min 下離心5min，待凈化。

二、樣品凈化（clover 磷脂去除專用柱，300mg/3mL貨號(hào)LIP3003）

上樣：取 2.5mL 待凈化液過柱，重力作用下洗脫，收集流出液；

洗脫：再加 625μL 80% 乙腈水進(jìn)行二次洗脫，收集流出液，施加真空排空液體，合并兩次流出液；

將 0.5mL 樣品洗脫液和 0.3mL H2O 加入到樣品瓶中，渦旋混勻，過 0.22μm 有機(jī)濾膜供上機(jī)測(cè)試。

三、標(biāo)曲配制

采用空白基質(zhì)配制標(biāo)曲，內(nèi)標(biāo)法定量，標(biāo)曲濃度范圍 0.5~100ppb。

四、儀器條件

色譜條件：

儀器：UPLC/MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura )

色譜柱：CLOVER® ODS (2.1mm×50mm, 1.8μm)

流動(dòng)相：A：水 ( 含 0.1% 甲酸） B：甲醇（含 0.1% 甲酸）

洗脫方式：梯度洗脫，見表 1

表 1 梯度洗脫程序

時(shí)間 /min	A%	B%
0	98	2
0.25	98	2
2.0	70	30
4.0	70	30
4.2	5	70
6.2	5	70
6.5	2	98
7.8	2	98
8.0	98	2
10.0	98	2

流速：0.4mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：8μL

質(zhì)譜條件：

離子源：HESI

電噴霧電壓：3500 V

鞘氣壓力：40 arb

輔氣壓力：2 arb

離子傳輸管：380℃

輔氣溫度：420℃

表 2 分析所選的獸藥離子對(duì)

序號(hào)	物質(zhì)名稱	保留時(shí)間	母離子	定量離子	定性離子
1	甲硝唑	2.38	171.95	128	82.2
2	特布它林	2.49	226	152	125
3	沙丁胺醇	2.52	240	148	222
4	萊克多巴胺	3.91	302.1	164	284
5	克倫特羅	4.24	277	203	259
6	磺胺甲基嘧啶	3.21	265.0	156	172
7	磺胺二甲基嘧啶	3.59	279.0	186	156
8	磺胺間甲氧嘧啶	4.38	281	156	108
9	磺胺二甲氧嘧啶	5.38	311	156	108
10	磺胺喹惡啉	5.43	300.9	156	108
11	磺胺甲惡唑	4.19	253.9	156	108
12	金剛烷胺	3.74	152.0	135.1	93.1
13	氧氟沙星	3.80	362.1	318.0	261
14	諾氟沙星	4.00	320.1	276	233
15	環(huán)丙沙星	4.18	332.0	231	288.01
16	洛美沙星	4.40	352.1	265	308
17	氯霉素	5.22	320.9	151.9	256.9
18	氟苯尼考	4.05	355.9	184.8	335.8
19	喹乙醇代謝物	4.65	189	143	145

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表 3. 不同品牌除脂產(chǎn)品應(yīng)用于豬肉中 19 種獸殘加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果（加標(biāo)濃度 16ng/mL，n=3）

序號(hào)	物質(zhì)名稱	平均回收率（%）
		A 品牌	W 品牌	clover 磷脂去除專用柱
1	甲硝唑	74.96	75.15	71.40
2	特布它林	65.06	70.48	72.54
3	沙丁胺醇	70.33	70.33	82.84
4	萊克多巴胺	78.52	114.01	87.46
5	克倫特羅	85.81	111.30	75.57
6	磺胺甲基嘧啶	84.13	79.92	81.64
7	磺胺二甲基嘧啶	83.97	121.17	80.71
8	磺胺間甲氧嘧啶	78.93	116.73	77.53
9	磺胺二甲氧嘧啶	96.88	78.48	72.96
10	磺胺喹惡啉	94.57	67.99	69.15
11	磺胺甲惡唑	67.21	128.20	79.36
12	金剛烷胺	80.45	115.32	91.23
13	氧氟沙星	63.84	120.01	69.93
14	諾氟沙星	71.71	117.07	76.24
15	環(huán)丙沙星	75.24	113.07	73.79
16	洛美沙星	75.14	109.68	75.13
17	氯霉素	95.96	83.98	81.01
18	氟苯尼考	119.19	117.9	92.11
19	喹乙醇代謝物	60.55	108.43	73.62

六注意事項(xiàng)

1. 為防止沙星類化合物的損失，故先使用 0.1M Na2EDTA 緩沖液進(jìn)行水溶液萃取。

2. 為改善與固體殘留物的相分離，進(jìn)一步降低溫度對(duì)部分目標(biāo)物的影響，建議使用低溫離心 (4℃ )。

3. 為進(jìn)一步確保蛋白及部分固體殘留物的有效去除，建議使用高速離心 (9000r/min)。

4. 建議加入內(nèi)標(biāo)物，采用空白基質(zhì)配制標(biāo)曲，有利于校正目標(biāo)分析物的回收率。

訂購信息

貨號(hào)	描述	包裝
LIP3003	clover 磷脂去除專用柱，300 mg/3 mL	50 支 / 盒
YQ-CL-200	CLOVER 多管渦旋混勻儀	1臺(tái)/箱

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